尼康D300S在2009年7月正式发布，算起来销售上市时间约为5年。该产品与之前的D300对比，增加包括视频拍摄在内的不少新功能，其拥有1230万有效像素的CMOS影像传感器，每秒约7幅的连拍速度。默认ISO200-3200，通过扩展可达ISO100-6400。51点自动对焦系统，3英寸92万像素LCD显示屏。融入了当时主流的视频拍摄功能，优化的D-Movie（数码短片）功能提供最大1280×720/24fps的高清视频拍摄。支持双卡存储的功能，提供了CF和SD的双卡插槽。